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- sunmoon9927 2015-09-29 00:00:00
- 水煮模板法——主要用于PCR反應(yīng)1、接種單菌落于LB或腦心平板，連續(xù)畫線，37攝氏度培養(yǎng)18－24小時(shí)。2、刮取1~2接種環(huán)菌苔加入150微升三蒸水中，混勻，100攝氏度煮沸10分鐘。3、12000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘，取上清，－20攝氏度保存?zhèn)溆谩２僮鱖簡(jiǎn)便，對(duì)試劑條件要求低。缺點(diǎn)是純度不夠高，可能會(huì)含有RNA、蛋白等雜質(zhì)。但是作為一般檢測(cè)目的的PCR反應(yīng)模板已經(jīng)足夠了。有人稱擴(kuò)增4kb以下片段都可用此種方法制取模版，編者用此類模板PCR可以擴(kuò)增到3500bp的片段。編者建議：此法得到的模版保存時(shí)間短，強(qiáng)烈建議每月重新制作一次。
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- 潛新兒 2016-02-05 00:00:00
- 水煮模板法——主要用于PCR反應(yīng)1、接種單菌落于LB或腦心平板，連續(xù)畫線，37攝氏度培養(yǎng)18－24小時(shí)。2、刮取1~2接種環(huán)菌苔加入150微升三蒸水中，混勻，100攝氏度煮沸10分鐘。3、12000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘，取上清，－20攝氏度保存?zhèn)溆谩２僮鱖簡(jiǎn)便，對(duì)試劑條件要求低。缺點(diǎn)是純度不夠高，可能會(huì)含有RNA、蛋白等雜質(zhì)。但是作為一般檢測(cè)目的的PCR反應(yīng)模板已經(jīng)足夠了。有人稱擴(kuò)增4kb以下片段都可用此種方法制取模版，編者用此類模板PCR可以擴(kuò)增到3500bp的片段。編者建議：此法得到的模版保存時(shí)間短，強(qiáng)烈建議每月重新制作一次。
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