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- 漢共操耗侄障說 2017-11-15 00:00:00
- (1) 收集霉菌孢子并稀釋涂布于貼有玻璃紙的PDA培養基中，培養20 h后收集新鮮菌絲體 (2) 取0.5 g 菌絲體置于冰預冷的研缽中，加入0.1 g石英砂和2 mL冰預冷的CTAB抽提液，加入蛋白酶K至終濃度0.1 mg/mL，置冰上研磨成均勻渾濁液； (3) 液體轉入5 mL離心管并加入1/10體積的10% SDS，65℃溫浴20～30 min后冷卻至室溫； (4) 加入等體積Tris飽和酚-氯仿（1:1）抽提2次，上層水相轉入新的離心管； (5) 加入等體積氯仿抽提1次，上層水相轉入新的離心管； (6) 加入無DNase活性的RNase A至終濃度10 g/mL，37℃溫浴30～60 min； (7) 重復步驟5一次； (8) 上層水相加入2倍體積無水乙醇，輕輕混勻； (9) 用使用無菌移液器吸嘴輕輕挑出染色體DNA，在70%乙醇中洗滌一次，室溫涼干殘留乙醇； (10) 加適量體積的TE溶液溶解，保存于4 ℃。
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滬公網安備 31011502008050號
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