細(xì)胞融合PEG法和電融合法對比
在自發(fā)或人工誘導(dǎo)下，兩個細(xì)胞或原生質(zhì)體融合，使得一個雜種細(xì)胞形成，即是細(xì)胞融合(cell fusion)。
細(xì)胞融合中的化學(xué)法誘導(dǎo)
1、PEG誘導(dǎo)
2、PEG結(jié)合高Ca2+和PH誘導(dǎo)法
3、NaNO3誘導(dǎo)
NaNO3可以對原生質(zhì)體表面負(fù)電荷進(jìn)行中和，對原生質(zhì)體聚集起到促進(jìn)作用，不會損害原生質(zhì)體，然而卻沒有較高的融合效率。
4、高Ca2+和pH誘導(dǎo)法
基本原理
聚乙二醇(PEG)是一種多聚化合物,實(shí)驗(yàn)室用的PEG,200-2000之間為平均相對分子質(zhì)量范圍，固體狀態(tài)通常超過1000，液體狀態(tài)通常小于1000.
機(jī)制
因?yàn)橛写罅控?fù)電荷為PEG分子所帶有，靜電鍵是由于其和原生質(zhì)體表面的負(fù)電荷在鈣離子的連接下形成的。從而分子橋在原生質(zhì)體之間形成，導(dǎo)致原生質(zhì)體發(fā)生粘連從而對原生質(zhì)體的融合起到了促進(jìn)作用。除此之外，PEG使得類脂膜的流動性得以增加，從而增大了原生質(zhì)體的核、細(xì)胞器發(fā)生融合的可能性。
質(zhì)膜結(jié)合的PEG分子使用高Ca2+和PH溶液進(jìn)行洗脫,造成電荷平衡因此失調(diào)而重新分配的結(jié)果，連接兩種原生質(zhì)體上的正負(fù)電荷，從而使得具有共同質(zhì)膜的融合體形成。
物理法
基本原理
盡管很晚才開發(fā)，然而目前為止，有著比較廣泛的應(yīng)用。融合儀和融合板為電融合必備的儀器。細(xì)胞膜表面的氧化還原電位經(jīng)過直流電脈沖的誘導(dǎo)發(fā)生了改變，粘合了異種細(xì)胞且瞬間破裂質(zhì)膜，然后開始連接質(zhì)膜，一直到完整的膜閉和成功，使得融合體形成。
相比于PEG法,電融合法有如下優(yōu)點(diǎn):
1、有很高的融合率，很強(qiáng)的重復(fù)性以及對原生質(zhì)體傷害小。
2、操作簡單，裝置精巧，能夠在顯微鏡下觀察或錄像融合過程。
3、使PEG誘導(dǎo)后的洗滌過程免去了，更加可以對誘導(dǎo)過程進(jìn)行控制。
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