開工必讀！TSKgel色譜柱清洗再生方法及注意事項
色譜柱清洗再生
方法及注意事項
春節長假已過，人到崗，心歸位，大部分色譜人已經迅速進入了工作狀態。為了保障分析工作的順暢進行，確保色譜柱處于"最 佳狀態"是非常重要的。
本期推送小編將給大家介紹以下3種類型的TSKgel色譜柱的清洗再生及保存方法，助您輕松開工！
1、SW型硅膠基質尺寸排阻色譜柱
TSKgel SW、SWXL、SuperSW以及UP-SW系列都是硅膠基質的SEC色譜柱，使用含水緩沖液作為流動相，用來分離蛋白質、肽、核酸等樣品。此類型色譜柱的清洗步驟按照如下：
1）反向連接色譜柱，并以最 大流速的1/2運行色譜柱。
2）使用5倍柱體積 (CV) 的0.5 mol/L硫酸鈉，pH 3.0溶液沖洗色譜柱。
3）使用5 CV Milli-Q或去離子水沖洗色譜柱。
4）使用5 CV 20%乙腈清洗色譜柱。
5）使用5 CV Milli-Q或去離子水沖洗色譜柱。
6）再正向連接色譜柱，并以樣品分析時的流速使用至少10 CV的流動相來平衡色譜柱。
※請注意：應逐漸提高流速，以免損壞色譜柱。
2、PW型聚合物基質SEC色譜柱
TSKgel PW、PWXL、SuperMultiporePW系列以及SuperOligoPW系列產品都是用于高分子分子量測定的親水性聚甲基丙烯酸酯樹脂SEC色譜柱。此類型色譜柱中的充填介質與樣品間常會發生離子相互作用或疏水相互作用等現象。
1）對于陽離子性吸附物質，可以通過提高鹽濃度進行過柱清洗。
2）對于疏水性吸附物質，可以通過提高有機溶劑的濃度進行過柱清洗。
3）去除難溶性蛋白質，可使用含尿素的溶液清洗。但需要留意尿素可能會殘留在色譜柱上。
3、親水性聚合物基質蛋白分離用色譜柱
TSKgel親水性聚合物基質的蛋白分離用色譜柱，包括SuperQ-5PW, DEAE-5PW, SP-5PW, CM-5PW, DEAE-NPR, SP-NPR, BioAssist Q/S這幾個型號的離子交換色譜柱，還有疏水、親和等其他多種類型的柱子。
1）先使用0.1～0.2 mol/L氫氧化鈉水溶液或20～40%的醋酸水溶液進樣清洗 (100 μL, 3～5針) 即可沖掉色譜柱上吸附的雜質。如果采用該方法清洗后，色譜柱性能仍無法恢復，再考慮以下兩種方法。
2）去除疏水性雜質：在清洗液中添加10-20 %的甲醇、乙腈等有機溶劑后過柱清洗。
3）去除難溶性蛋白：在清洗液中添加6-8 mol/L的尿素或0.2-0.3 %的中性表面活性劑 (Triton、Tween、Brij等) 后過柱清洗。但需注意尿素及界面活性劑可能在柱中殘留。
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