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基質(zhì)膠——3D類器官培養(yǎng)成功的關(guān)鍵

來源:翌圣生物科技(上海)股份有限公司      分類: 2022-09-15 00:00:00 16閱讀次數(shù)
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隨著COVID-19疫情的持續(xù)影響,多國都開啟了保護主義模式,全球化進程戛然而止,作為21世紀最具前景的生命科學也受到了相關(guān)沖擊。在今年4~6月份,基質(zhì)膠在全國大面積缺貨,導致很多企業(yè)無法按時完成產(chǎn)品和服務(wù)交付、科研工作者科研成果不能及時發(fā)表以及即將畢業(yè)的莘莘學子們的畢業(yè)論文無法按時完成實驗導致畢業(yè)進程受到很大的影響。在中美脫鉤的影響下,如果出現(xiàn)關(guān)鍵性生物原料出現(xiàn)如芯片一樣的卡脖子問題,將會對中國的生命科學產(chǎn)業(yè)和研究造成嚴重沖擊,這是我們不想看到的,因此加速國產(chǎn)替代是個必然趨勢和過程。
 

基質(zhì)膠(Basement membrane matrix)是從富含胞外基質(zhì)蛋白EHS小鼠腫瘤中提取出的可溶性基底膜制備物,其主要成分由層粘連蛋白,Ⅳ型膠原,硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)和巢蛋白等組成,還包含生長因子如TGF-beta、EGF、IGF、FGF、組織纖溶酶原激活物和EHS腫瘤自身含有的其他生長因子。在1980年代中期由丹麥的 J. Engelbreth-Holm和Richard Swarm二者分別發(fā)現(xiàn)并具體描述基質(zhì)膠[1],其主要生產(chǎn)過程是用鹽水提取/洗滌腫瘤勻漿后可溶性蛋白質(zhì),再用溶劑萃取產(chǎn)物中不溶性復合物,在低溫下使用緩沖液進行透析后獲得無色到淡黃色溶液。

 

表:基質(zhì)膠組分【1】

 
基質(zhì)膠為組織和細胞提供支撐、抗拉強度和支架支撐,也可以作為細胞粘附和運動的三維亞結(jié)構(gòu)以及生長因子、趨化因子和細胞因子的儲存庫,同時可作為細胞形態(tài)發(fā)生和分化的信號等。翌圣生物開發(fā)生產(chǎn)的Ceturegel®基質(zhì)膠不含LDEV(乳酸脫氫酶增高病毒),超低內(nèi)毒素含量,并全部經(jīng)過支原體檢測保證無支原體污染,包括基本濃度、高濃度、低生長因子等不同類型基質(zhì)膠。 

 

基質(zhì)膠應(yīng)用方向

 

 

產(chǎn)品特點

 
 

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產(chǎn)品種類

 

  • 基本濃度(8-12mg/mL)

  • 低生長因子

  •  高濃度(≥18 mg/mL)

  • 干細胞專用

  • 類器官專用

 

應(yīng)用驗證

 

圖:細胞侵襲后經(jīng)結(jié)晶紫染色的結(jié)果

 


圖.血管生成明場和熒光結(jié)果

 

圖.細胞3D培養(yǎng)4d后結(jié)果

 

 

 

Q&A
 
 
 

拿到的基質(zhì)膠有色差的變化(淡黃色到深紅色)是什么原因?

對于含酚紅的基質(zhì)膠主要原因是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的,但是與5%CO2平衡后色差即會減少。凍融后,輕輕搖晃試劑瓶使基質(zhì)膠分散均勻。

圖片
基質(zhì)膠的操作要注意哪些事項?

 

所有操作需在無菌環(huán)境下進行,應(yīng)使用預(yù)冷的器材以保證基質(zhì)膠正常操作。

圖片
基質(zhì)膠如何分裝凍存使用?

可將凍融后的基質(zhì)膠分裝在多個凍存管,凍存管需預(yù)冷,分裝后迅速冷凍并保存,避免多次凍融。

 

 

相關(guān)產(chǎn)品

類型

貨號

產(chǎn)品名稱

應(yīng)用方向

即用型

3-6 mg/ml

40182

Ceturegel®  Matrix Ready-to-use,LDEV-Free基質(zhì)膠

適應(yīng)于細胞培養(yǎng)、貼壁、侵襲和遷移實驗以及細胞分化等研究

 

基本濃度

8-12 mg/ml

40183

Ceturegel® Matrix LDEV-Free基質(zhì)膠

適應(yīng)于2D和3D培養(yǎng)、侵襲和遷移實驗,也可以用于體內(nèi)成瘤實驗

40184

Ceturegel® Matrix Phenol Red-Free,LDEV-Free 基質(zhì)膠

主要應(yīng)用于需要顏色檢測如熒光檢測實驗等

 

高濃度

≥18mg/ml

40187

Ceturegel® Matrix High Concentration,LDEV-Free 基質(zhì)膠

 

主要應(yīng)用于如血管生成、凝膠栓塞和體內(nèi)成瘤實驗(對于血管生成建議基質(zhì)膠終濃度要≥10mg/ml)

40189

Ceturegel® Matrix High Concentration,GFR,LDEV-Free 基質(zhì)膠

40188

Ceturegel® Matrix High Concentration,Phenol Red-Free,LDEV-Free 基質(zhì)膠

 

 

低生長因子

40185

Ceturegel® Matrix GFR,LDEV-Free 基質(zhì)膠

 

主要是排除生長因子對實驗的干擾。應(yīng)用于與生長因子、信號通路等相關(guān)研究。無酚紅的也用來做類器官培養(yǎng)

40186

Ceturegel® Matrix GFR,Phenol Red-Free,LDEV-Free 基質(zhì)膠

干細胞用

40190

Ceturegel® Matrix hESC-Qualified,LDEV-Free 基質(zhì)膠

主要用于如hESC,iPSC等干細胞培養(yǎng)

類器官用

40191

Ceturegel® Matrix for Organoid culture,Phenol Red-Free,LDEV-Free 基質(zhì)膠

類器官培養(yǎng)專用基質(zhì)膠

 

鼠尾膠原

40125

Collagen, Type I , from rat tail 鼠尾膠原蛋白I(大鼠源)

侵襲和遷移。培養(yǎng)或分化研究

40136

Cebrary® Collagen, Type I , from mouse tail 鼠尾膠原蛋白I型(小鼠源)

侵襲和遷移。培養(yǎng)或分化研究

點擊上方藍字產(chǎn)品名稱,查看詳情

 

[1] Kleinman H K , Martin G R . Matrigel: basement membrane matrix with biological activity.[C]// Seminars in Cancer Biology. 2005.

 

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