CHIR-99021 monohydrochloride（又名CHIR99021 monohydrochloride，CT99021 monohydrochloride，CT-99021 monohydrochloride，CT99021 HCl，Laduviglusib monohydrochloride）是一種有效的、選擇性、特異性較高的糖原合酶激酶-3（GSK-3α/β）抑制劑（IC₅₀值分別為10 nM和6.7 nM），其對CDC2、ERK2和GSK-3等蛋白激酶也有抑制作用。此外，CHIR-99021 monohydrochloride也是一種有效的Wnt/β-catenin信號通路激活劑，其在非小細胞肺癌（NSCLC）細胞中上調cyclin A表達并促進細胞增殖。CHIR-99021 monohydrochloride通過調節轉化生長因子β（TGF-β）和絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）等信號通路而促進小鼠或人胚胎干細胞的自我更新。CHIR-99021 monohydrochloride穩定下游效應子c-Myc和β-catenin，從而促進B6和BALB/c ES細胞的自我更新，維持細胞多能性。CHIR-99021 monohydrochloride能誘導細胞自噬(autophagy)。

產品性質

運輸和保存方法

冰袋運輸。粉末直接保存于-20℃，有效期2年。建議分裝后-20℃避光保存，避免反復凍融。

注意事項

1. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

2. 粉末溶解前請先短暫離心，以保證產品全在管底。

3. 請勿吸入、吞咽或者直接接觸皮膚和眼睛。

4. 本產品僅用于科研用途，禁止用于人身上。

使用濃度

【具體使用濃度請參考相關文獻，并根據自身實驗條件（如實驗目的，細胞種類，培養特性等）進行摸索和優化。】

使用方法（數據來自于公開發表的文獻，僅供參考）

（一）細胞實驗（體外實驗）

為了檢測CHIR-99021促分化的作用，在含CHIR-99021的胰腺或腸道誘導培養基中連續培養hEPCs四天，之后分別評估細胞中胰腺譜系特異性轉錄因子PDX1和腸系分化特異性轉錄因子CDX2的表達。與hASCs對比，hEPCs的PDX1和CDX2顯著提高，說明CHIR-99021可以維持hEPCs多維分化潛能。^[1] 研究表明膜透性小分子在不同種類胚胎干細胞的維持和分化過程中起到重要作用。GSK3是其中一個典型的靶點，它可以激活Wnt/β信號通路。我們對四種GSK3抑制劑進行了研究。分別為BIO、SB-216763、CHIR-99021和CHIR-98014。結果顯示：CHIR-99021和SB-216763對小鼠胚胎干細胞毒性最低，CHIR-98014和BIO毒性最高。在四種GSK3抑制劑中，CHIR-99021和CHIR-98014是Wnt/beta-catenin信號通路的有效激活劑。其中CHIR-99021激活效能高，且細胞毒性較低。在CHIR-99021存在的情況下，ES-D3細胞在2.5 μM、5 μM、7.5 μM和10 μM CHIR-99021的存活率分別降低了24.7%、56.3%、61.9%和69.2%，IC50為4.9 μM。^[3]

（二）動物實驗（體內實驗）

ZDF大鼠模型，單次口服16-48 mg/kg劑量CHIR-99021可在不影響動物體重的情況下，顯著降低血漿葡萄糖含量。^[2] 研究表明CHIR99021可以保護小鼠和Lgr51細胞，減少因受輻射誘導的胃腸道損傷。我們測定了CHIR99021對小鼠的藥效。CHIR99021 (2 mg/kg)在照射前4 h給予一次，可以顯著提高14.5 Gy腹部照射(ABI)后的存活率。CHIR99021的處理顯著阻斷了隱窩細胞凋亡和p-H2AX1細胞的積累，促進了隱窩再生和絨毛高度。CHIR99021的處理通過阻斷細胞凋亡從而提高了DLGR51細胞的存活率，并在4 h內有效地阻止了Olfm4、LGR5和CD44的減少。CHIR99021對放射性胃腸道損傷有很強的保護作用。^[4]

參考文獻

[1]. Ma Y, Ma M, Sun J, Li W, Li Y, Guo X, Zhang H. CHIR-99021 regulates mitochondrial remodelling via β-catenin signalling and miRNA expression during endodermal differentiation. J Cell Sci. 2019 Jul 31;132(15): jcs229948.

[2]. Ring DB, et al. Selective glycogen synthase kinase 3 inhibitors potentiate insulin activation of glucose transport and utilization in vitro and in vivo. Diabetes. 2003 Mar;52(3):588-95.

[3]. Naujok O, et al. Cytotoxicity and activation of the Wnt/beta-catenin pathway in mouse embryonic stem cells treated with four GSK3 inhibitors.BMC Res Notes. 2014 Apr 29; 7:273.

[4]. Wang X, et al. Pharmacologically blocking p53-dependent apoptosis protects intestinal stem cells and mice from radiation. Sci Rep. 2015 Apr 10; 5:8566.

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