近日在《Stem Cells and Development》期刊雜志上發(fā)表題為《Bone Marrow Stromal Cell-Derived Exosomes promote muscle healing following contusion through macrophage polarization》的文章。在這項研究中，使用梯度離心從BMSC的上清液中分離和純化外泌體。納米粒子跟蹤分析，透射電子顯微鏡和蛋白質(zhì)印跡被用來鑒定外泌體。使用ECHO正倒置一體熒光顯微鏡對HE染色，Masson染色和免疫熒光的肌肉樣本進行成像。ZH得到的結(jié)論：BMSC-Exos通過改變巨噬細胞的極化狀態(tài)YZ炎癥反應，減輕了小鼠的肌肉挫傷損傷并促進了肌肉的愈合。

背景介紹：

骨骼肌挫傷是運動醫(yī)學和臨床Z常見的損傷之一。由于挫傷后局部纖維化形成，受傷的肌肉很容易再次受傷，骨骼肌纖維化被證明與損傷初期的過度炎癥反應有關，而與炎癥浸潤密切相關的巨噬細胞被發(fā)現(xiàn)在骨骼肌的愈合過程中起著至關重要的作用。如何調(diào)節(jié)巨噬細胞極化仍然是肌肉愈合的重要問題。

Z近的研究表明，骨sui基質(zhì)細胞源性外泌體（BMSC-Exos）可以影響炎癥和組織恢復。因此，作者假設BMSC-Exos可以通過影響巨噬細胞極化來下調(diào)炎癥反應，從而促進挫傷后骨骼肌的愈合。在這項研究中，作者從BMSC中分離了BMSC-Exos，在體內(nèi)和體外測試了它們的功能，并研究了BMSC-Exos對巨噬細胞免疫調(diào)節(jié)和肌肉愈合影響的潛在機制。

實驗方法：

通過粒度分析、透射電鏡和Western Blot方法鑒定外泌體，為了檢查靶蛋白的表達和位置，在TA（脛前肌）切片上進行了免疫熒光染色。使用的一抗是抗CD206，抗α-SMA，抗MyoD和抗Pax7，DAPI用于定位細胞核，通過熒光顯微鏡（ECHO Revolve，美國）觀察圖像。

結(jié)果：

總體外觀，相對重量，形態(tài)特征：挫傷損傷后3d，挫傷組的TA肌肉比BMSC-Exos組的肌肉血腫更大（圖3A）。兩組之間在第三天，TA肌肉的相對肌肉重量也顯著不同，挫傷組的TA肌肉較重（圖3B）。

對于HE染色，在陰性對照組中，肌肉纖維規(guī)則且密集地排列。但是，在挫傷組中，隨著時間的流逝，肌肉纖維變得越來越分散，許多增殖的膠原纖維占據(jù)了肌肉纖維的空間，這些現(xiàn)象在BMSC-Exos組中得到了改善。Masson染色中，在挫傷組中觀察到大量膠原纖維，而BMSC-ExosZL在所有時間點均顯著減少了纖維化區(qū)域（圖3C-D）。

此外，為了進一步檢查纖維化狀況，作者對平滑肌肌動蛋白α（α-SMA）進行了免疫熒光染色。形態(tài)學結(jié)果表明，BMSC-ExosZL顯著降低了挫傷在不同時間點引起的高蛋白表達和α-SMA的廣泛分布（圖4）。巨噬細胞耗竭后，BMSC-Exos的抗纖維化作用受到Y(jié)Z，挫傷和BMSC-ExosZL組在第14天均觀察到大的纖維化區(qū)域和廣泛分布的α-SMA蛋白。

為了確定衛(wèi)星細胞的不同成肌狀態(tài)，進行了Pax7和MyoD的共定位。形態(tài)上，從受傷后3天開始，總的Pax7 + / MyoD +衛(wèi)星細胞顯著增加。顯然，BMSC-ExosZL組的數(shù)量多于挫傷組和陰性對照組。在三個不同的組中，相對的Myod蛋白表達也呈現(xiàn)出類似的趨勢（圖5D）。綜上所述，BMSC-Exos注射液可在早期促進肌肉再生。

結(jié)論：

研究表明局部使用BMSC-Exos可以減少挫傷后的纖維化組織，增強肌肉再生并改善骨骼肌的生物力學特性。BMSC-Exos通過促進M2巨噬細胞極化，YZ了受傷肌肉的炎性微環(huán)境。作者的研究為BMSC-Exos在臨床實踐中可用于肌肉愈合提供了有力的支持。

Revolve正倒置一體顯微鏡

Revolve展現(xiàn)了其非凡的靈活性，可以輕松地實現(xiàn)正置和倒置顯微鏡轉(zhuǎn)換，創(chuàng)新性地把正倒置顯微鏡合二為一，開啟了顯微鏡Hybrid時代。

?   視網(wǎng)膜屏顯示技術：比擬目鏡人眼觀察效果。

?  全視野觀察：更清晰，更方便。

?   多通道熒光：多達4個EPI熒光通道，無須暗室，就可以輕松快速地完成多色熒光顯微分析。

?   自動化操作：通過iPad Pro點觸操控相機及熒光通道之間的切換，實現(xiàn)了完全自動化操作。

?   App應用軟件：基于IOS的Echo App是與Apple團隊合作研發(fā)的專業(yè)顯微鏡軟件。

?   精湛的工藝盡顯高端品質(zhì)：實現(xiàn)非凡的性能。